产品货号：ZC-BP-005

产品名称：百日咳鲍特菌增菌培养检测试剂盒

包装规格：20T/盒

主要组成成份：百日咳鲍特菌样本采集液（2.0mL*20 支）、基础增菌液（1.8mL*20 支）、添加剂 A（200μL*2支）、添加剂 B（1mL*4支）、木炭选择性琼脂平板（90mm*10块/包*2包）

预期用途：百日咳鲍特菌、副百日咳鲍特菌等病原菌多粘附于人类鼻咽部粘膜，本试剂盒主要用于百日咳鲍特菌和副百日咳鲍特菌样本的采集、增菌、分离和培养

贮存条件及保质期：百日咳鲍特菌样本采集液 2-8℃避光保存，保质期 12 个月；基础增菌液、木炭选择性琼 脂平板 2~8℃避光保存，添加剂 A、添加剂 B -20℃避光保存，有效期均为 3 个月。

使用方法：

1.标本采集及保存 

1.1 标本采集：根据采样要求，使用鼻/咽拭子采集样本；将采样拭子放到百日咳鲍特菌 样本采集液中，折断采样拭子杆高出部分或按断点折断拭子，拧紧盖子，标记样本信息，冷 藏送至实验室处理。 

1.2 标本处理：将样本采集液中的鼻/咽拭子充分挤压 50~80 次或者涡旋震荡 30s，让标 本中的细菌均匀分布于采集液；若需对标本先进行 PCR 筛查，可取充分浸润的样本采集液 300~500μL，用于标本 DNA 的提取，然后进行百日咳荧光 PCR 的检测。 1.3 标本保存：若标本预计 48h 内进行检测，可于 2~8℃冷藏保存；若标本计划 1 个月 内完成检测，可于-20℃低温冻存；若标本需长期保存，可-70℃以下超低温冻存。低温保存 期间标本不可冻融。

2.增菌培养

2.1 增菌液配制：百日咳鲍特菌增菌液须现用现配，实验前取所需数量的基础增菌液、 添加剂 A、添加剂 B，无菌操作放入生物安全柜，溶化后将添加剂 A、B 颠倒混匀瞬时离心， 分别取添加剂 A 20μL、添加剂 B 200μL 加入到 1.8 mL 的基础增菌液中混匀备用。 注：①实验过程严格执行无菌操作；②百日咳鲍特菌增菌液需要现用现配；③添加剂反复冻融会降低分 离培养效果，建议第一次使用后适当分装冻存。 2.2 增菌培养：将处理后的样本采集液振荡或涡旋混匀，取 200μL 加入到 2 mL 现配的 百日咳鲍特菌增菌液中，37±1˚C 静置培养 48 h～72 h。冻存标本需解冻溶化后混匀使用。 注：期间可对增菌液进行 PCR 检测，确定百日咳鲍特菌的生长状态。 

2.3 平板培养：增菌后充分混匀培养液，取 50-100μL 的增菌液划线或者直接涂抹于木 炭选择性琼脂平板上，37±1˚C 培养 3～7 天，挑取疑似菌落进行镜检、生化试验、荧光 PCR 或者质谱等方法鉴定。 注：增菌后培养液不浑浊或略微浑浊，若培养液有明显的浑浊现象，疑似染菌，建议重新增菌培养。 

检验结果的解释: 银灰色菌落：疑似百日咳鲍特菌、副百日咳鲍特菌。

检验方法的局限性：本试剂盒仅用于百日咳鲍特菌、副百日咳鲍特菌样本的采集、增菌、分离和培养，菌株 的鉴定需结合菌落形态、镜检、生化试验、荧光 PCR 或者质谱等方法综合判定。部分厂家 VTM 运送培养基等病毒型采集液采集的样本在增菌培养时可能会出现白色沉淀，影响结果， 不建议与本试剂增菌液配合使用。