（ 布病试管凝集抗原（光滑型） /      布病试管凝集抗原（粗糙型） /       布鲁氏菌试管凝集抗原检测试剂盒 ）

1.实验原理：

试管凝集法：灭活布鲁氏菌抗原与待检血清混合，如果待检血清中存在布鲁氏菌抗体，则发生肉眼可见的凝集反应。

2.设备及器材：

试管凝集抗原、被检血清、生理盐水、1ml 吸管及 10ml 吸管、凝集管、37℃ 保温箱、试管架；

3.实验方法：

3.1 被检血清的稀释：每份血清用 5 支试管（必要时也可以多于 5 支试管）

第一管加入 2.3mL 生理盐水，第二管不加，第三、四、五管各加 0.5mL 。

吸取被检血清 0.2mL ，加入第一管中，混匀。混匀后，吸取第一管中血清加入第二管和第三管各 0.5mL ，将第三管混匀，并吸取 0.5mL加入第四管，混匀。从第四管吸取 0.5mL 加入第五管，混匀。再从第五管吸取 0.5mL 弃去。如此稀释后，从第二管到第五管血清稀释度分别为 1:12.5，1:25，1:50，1:100 。

3.2 加入抗原：先以生理盐水将抗原原液 1:10 稀释。

稀释后的抗原加入各稀释度的血清管(第一管不加，作为血清对照)，每管加 0.5mL ，混匀。加入抗原后第二管至第五管，每管总量 1mL ，血清稀释度从第二管至第五管分别为 1:25，1:50，1:100 和 1:200 ，从第一管再吸出 0.5mL ，剩 1mL 。

3.3 对照：阴性血清对照，血清稀释后加抗原（与被检血清对照相似）；阳性血清对照，其血清稀释到原有滴度，再加抗原（与被检血清操作一致，一般选取 4 个稀释度）；抗原对照，适当稀释的抗原加生理盐水。

3.4 定比浊管制备：每次试验须配制比浊管作为判定的依据。配制方法是：取本次试验用的 1:10 稀释的抗原再作对倍稀释，即 5mL 稀释抗原再加 5mL 生理盐水，混合后按下表配制比浊管。

全部试验管、对照管及比浊管充分振荡后置 37℃ 温箱中 20h~22h ，取出后室温放置 1~2h ，然后以比浊管为标准判定结果。

3.5  检验结果的解释

1）++++ :  完全凝集，上层液 100% 清亮。

2）+++ ：几乎完全凝集，上层液 75% 清亮。

3）++ ：显著凝集，液体 50% 清亮。

4）+ ：有微量凝集，液体 25% 清亮。

5）- ：无凝集，液体不清亮。

待测样本检测人血清 ≥ 1:100++ 为阳性；待测样本检测人血清 <1:100++ 为阴性。

4. 试验现象图片：