①取36℃±1℃培养18h～24h的新鲜大肠杆菌斜面，用稀释液洗下菌苔，适当稀释配制成试验用大肠杆菌悬液。

②分别取拟消毒水样3份，每份500mL，加入大肠杆菌悬液，混匀，制备染菌水样。每份取适量水样进行过滤，滤完后，再抽气5s，关闭滤器阀门，用无菌镊子夹取滤膜边缘，移放在品红亚硫酸钠培养基平板上。滤膜的细菌截留面朝上，滤膜与培养基完全紧贴。将平板倒置，放于36℃±1℃，培养48h，计数滤膜上生长的大肠杆菌数，应在5×10²CFU/100mL~2×10³CFU/100mL。

③在3份染菌水样中分别加入消毒剂，迅速混匀，使其达到拟消毒浓度。消毒至规定时间，每份水样分别移取2份，每份100mL，分别注入装有相应中和剂的无菌三角烧瓶中，以终止消毒作用。然后进行抽滤，方法同消毒前，计数滤膜上生长的大肠杆菌数。计数消毒后每100m水样中大肠杆菌数(CFU)。