肺炎支原体（M.Pneumonia）是人类支原体肺炎的病原体，大小约200nm，介于细菌和病毒之间，无细胞壁结构，菌落可呈“煎荷包蛋”形状，对热和干燥较敏感，56℃即灭活，4℃仅存活1d，在冻干情况下能长期保存。目前，国内外支原体的检测主要依靠实验室诊断手段，一般包括病原菌的培养、血清学、间接免疫荧光法以及分子生物学等检测技术。在大多数情况下，基于分子生物学的方法比间接检测方法（如血清学方法）具有更高的分析和临床诊断灵敏度，大多数核酸分子诊断技术检测方法可以检测到 100 CFU/mL 的 MP。

核酸变温扩增检测技术是常用的分子检测技术，包括：

1、实时 PCR ：与传统 PCR 反应相比，实时 PCR 反应具有灵敏度高、检测效率高，既能定性也可以定量反应。

2、广泛 PCR ：广泛 PCR 是 PCR 技术的一个重要改进，针对某一类或某一大类的微生物设计的通用型 PCR 技术。

3、巢式 PCR ：与普通 PCR 的不同之处在于扩增过程中设计的两个反应，每个反应需使用不同的扩增引物。第一对扩增引物片段和普通 PCR 相似，第二对引物称为巢式引物，位于第一对引物内侧，并以第一次扩增反应的产物为模板。巢式 PCR 的优点是 ：（1）先后使用两对引物可使循环数倍增，从而提高了 PCR 的灵敏度和所需 PCR 产物的产量；（2）反应特异性很高。如果第一次扩增产生了错误片段，则第二次能在错误片段上进行引物配对并扩增的概率极低，从而降低非特异性扩增反应的发生。

4、多重 PCR ：多重 PCR 也称复合 PCR，其原理与常规 PCR 相同，高温变性、低温退火、适温延伸，二者区别在于多重 PCR 是在同一 PCR 反应体系里加上 2 对以上引物，同时扩增出多个核酸片段。多重PCR 既有单个 PCR 的特异性和灵敏度，又相对快捷和经济，被广泛地应用于包括核酸诊断在内的诸多领域。