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兔补体检测活性的方法

浏览: 3 次 发布时间:2025-07-21

兔补体是存在于血清和组织液中的一组不耐热的具有酶活性的蛋白质,在兔的免疫防御和炎症反应中发挥关键作用。检测兔补体活性对了解其免疫状态和疾病诊断具有重要意义,常见方法如下:

溶血试验:

这是经典且常用的检测方法。首先,采集兔血液,分离血清作为待测样本。准备绵羊红细胞(SRBC)作为靶细胞,对其进行敏化处理,通常使用抗绵羊红细胞抗体。将不同稀释度的兔血清与敏化后的绵羊红细胞混合,在适宜温度(如37℃)下孵育一定时间,让补体系统被激活,进而裂解绵羊红细胞。通过离心分离未裂解的红细胞,测定上清液中释放的血红蛋白量,以此反映兔补体活性。血红蛋白量可通过分光光度计在特定波长(如541nm)下测定吸光度来确定,吸光度值越高,表明溶血程度越强,兔补体活性也就越高。

免疫化学法:

利用免疫学原理,通过特异性抗体与兔补体成分结合来检测活性。例如酶联免疫吸附试验(ELISA),将兔补体成分的特异性抗体包被在固相载体上,加入兔血清样本,使样本中的兔补体与抗体结合,再加入酶标记的二抗,最后加入底物显色。根据显色程度,使用酶标仪测定吸光度,可定量分析兔补体活性。该方法灵敏度高、特异性强,能准确检测特定兔补体成分的活性。

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