现行GB4789.9-2014《食品安全国家标准 食品微生物学检验 空肠弯曲菌检验》（以下简称GB4789.9法）中使用Bolton肉汤增菌，改良CCD和Skirrow血琼脂分离培养，如样品杂菌严重较难分离到弯曲菌，我国很多地区禽肉样品中空肠弯曲菌的检出率低于10%，严重低估了我国空肠弯曲菌食品污染的疾病负担。2019年中华预防医学会发布了T/CPMA 006-2019《空肠弯曲菌、结肠弯曲菌检验方法》团体标准（以下简称T/CPMA 006法），主要以增菌后过滤培养为基础，提高了食品样本中空肠弯曲菌的检出率，部分实验室采用T/CPMA 006标准方法对禽肉类空肠弯曲菌的分离率可达27%～75%。

据文献报道，深圳市南山区疾病预防控制中心采集2020年11-12月深圳市某市场39份贝类海鲜样品，采购青岛中创汇科生物科技有限公司改良CCD琼脂，Skirrow血琼脂，双孔滤膜法双孔板等进行GB4789.9法与T/CPMA006法检测空肠弯曲菌效果的比较实验。

1、实验内容：

采用GB4789.9和T/CPMA 006的2种标准方法对贝类海鲜进行空肠弯曲菌的分离，并通过模拟样品获得海鲜样品中弯曲菌的最低检出浓度和检出率，同时应用MALDI-TOF和荧光PCR作为空肠弯曲菌的验证和辅助检测。

2、样品来源：

采集2020年11-12月深圳市某市场39份贝类海鲜样品、空肠弯曲菌标准菌株ATCC33560；

3、仪器与试剂：

改良CCD琼脂（青岛中创汇科生物），Skirrow血琼脂（青岛中创汇科生物），双孔滤膜法双孔板（青岛中创汇科生物），质谱仪（MALDI-TOF，法国生物梅里埃），荧光PCR仪（美国Bio-Rad型号CFX96），智能厌氧系统，PCR Master，引物和探针等；

4、实验方案：

（1）原始样品的阳性检出率：分别用GB4789.9和T/CPMA 006的2种标准方法对采集到的深圳市某市场39份贝类海鲜样品，进行空肠弯曲菌检测；

（2）模拟样本的最低检出浓度：在检测阴性的标本中掺入终浓度分别为10⁰、10¹、10²、10³、10⁴、10⁵CFU/g的活菌进行模拟实验，每个浓度模拟3个样品，分析比较2种标准方法的最低检出浓度；

（3）最低检出浓度下的检出率：掺入终浓度分别为10³和10⁴CFU/g的空肠弯曲菌活菌，每个浓度各10份样品，比较2种标准方法的检出率差异；

（4）辅助检测：利用MALDI-TOF质谱和荧光PCR作为菌落验证和辅助检测；

5、实验结果：

6、实验结论：

（1）海鲜中也存在空肠弯曲菌的污染。

（2）与GB4789.9法相比，T/CPMA 006法可显著提高海鲜样品中空肠弯曲菌的检出率，并将最低检出浓度降低2个数量级。

本实验中T/CPMA 006的检测结果优于GB4789.9的原因是T/CPMA 006采用低速离心，可最大限度将样品中的弯曲菌富集，且采用广谱增菌液进行增菌，由于增菌液中加入促生长因子和血液成分，弯曲菌可以得到充分的增菌，最后获得较纯的弯曲菌，便于挑取。而SKIRROW血琼脂和改良CCD琼脂中生长出来的杂菌多，可疑菌落很少，容易漏检。

【参考文献】：刘楚云，马艳萍，段永翔等.海鲜产品中空肠弯曲菌2种检测标准的比较［J］.职业与健康，2023年9月第39卷第18期.