中创汇科布病检测产品介绍:
试管凝集试验(SAT)
(1)器材及试剂 ①器材:1ml、10ml 带刻度吸管或加样器、玻璃试管、试管架、 稀释抗原用的洁净容器、37℃培养箱。 ②试剂:试管凝集抗原、被检血清、生理盐水或 0.5%的石碳酸 生理盐水。
(2)操作方法 ①每份血清需用 9 支小试管,将试管放于试管架上。 ②血清稀释:第 1 支管加盐水 2.3ml,第 2 支不加,第 3 支到第 9 支管各加 0.5ml 盐水。然后用 1ml 吸管取被检血清 0.2ml 加入第 1 管中,混匀后吸 1ml 加入第 2、3 管各 0.5ml,第 3 管混匀后再吸 0.5ml 加入第 4 管,以此类推到第 8 管吸 0.5ml 弃掉。此时血清的稀释倍数 从第 2 管开始到第 8 管分别为 1:12.5、1:25、1:50、1:100、 1:200……1:800。 ③加入抗原:将试管凝集抗原充分混匀后,稀释成使用液(具体 稀释倍数参看试剂说明),然后从第 2 管开始每管加入 0.5ml,加入 - 7 - 抗原之后,血清的最终稀释倍数为从第 2 管开始 1:25、1:50、1:100、 1:200……1:1600,第 1 管为血清对照,最后一管为抗原对照,充分 混匀。 ④将试管充分振荡后,全部放于 37℃温箱中孵育,20~22 小时 后取出,在室温下放置 1~2 小时后观察结果。 (3)结果判定 ①为了判定准确,必要时应制备凝集反应标准比浊管,作为判定 透明程度的依据,其配制方法如下:取凝集反应稀释的抗原液再作对倍稀释,即 5ml 稀释抗原再加 5ml 生理盐水,混合后按下面方法配制。 ②血清对照为清亮透明无沉淀,抗原对照为均匀混浊。在两种对 照管都成立的情况下,才可判定试验管,否则应重做。 ③结果判读 “++++”液体完全透明,管底有伞状凝集,有时会有卷边,为 100%凝集; - 8 - “+++”液体近于完全透明,管底有伞状凝集,为 75%凝集; “++”液体略微透明,菌体呈较薄伞状凝集,为 50%凝集; “+”液体不透明,管底有不很明显的凝集,为 25%凝集; “-”液体不透明,无凝集现象。
3.人布鲁氏菌病荧光偏振测定法(FPA) (1)器材及试剂 ①器材:人布鲁氏菌病荧光偏振仪(具体参数见第五部分)、漩 涡震荡仪、1 毫升试管、连续加样器。 ②试剂:人用鲁氏菌病荧光偏振测定法标记抗原、阴性和阳性对 照血清、待检血清。
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