荧光偏振技术简述

  偏振光和荧光分子相结合形成的荧光偏能理论,正在生物学分支学料理论和应用研究中大显身手。成为基础料学研究和药物筛选研究中的一个重要检測手段。

  Perin于1926年首先描述了荧光偏振理论,他观察到溶液中的荧光分子在受到偏振光激发时,如果在激发时分子保持静止,该分子将发出固定偏振平面的发射光(发射光仍保持偏振性)。然而,如果分子旋转或翻转那么发射光的偏振平面将不同于初始激发光的偏振平面。分子的偏振性与分子旋转关时间成比例,分子旋转驰豫时间是分子转过 68.5度角时所用的时间。分子旋转驰豫时间与粘度、绝对湿度,分子体积和气体常数有关。

  光由微小的波构成,光波可以在任何一个平面上均匀的振动。当其通过某些平面时,有可能因受到平面的作用将光波的能量分成不均匀的光束,振动平面也就发生了变化,可能在个方向的振动强或弱于其他平面,这种光称为偏振光。化学研究中常用到偏氪光理论,这是因为偏振光在通过含有某种分子的溶液时,其损动性质将发生改变,如偏振平面受到扭转,根据转的方的和角度的变化,獻能够对溶液中分了的结构作出推断。

  荧光偏振分析是利用荧光偏振的原理,通过检测荧光素标记的小分子与其它分子相互作用前后分子量的变化,计算水平方向及垂直方向的荧光偏振值作相关分析。如果被检測分子大,激发时运动慢,测得的荧光偏振光值高。如果分子小,分子旋转或翻转速度快,发射光相对于激发光平面将去偏振化,测得的偏振光值低,从而计算出样品的偏振值(偏振伯单位MP)。通过专用分析软件,可对給则结果进行分析,判别等工作。

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