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荧光偏振免疫的技术原理

浏览: 1 次 发布时间:2021-09-09

荧光偏振免疫技术原理

  荧光偏振免疫技术原理荧光俯振免疫方法(fluorescence polarization immunoassny FPIA)依据荧光标记抗原和其抗原抗体结合物之间荧光偏振程度的差异,用竞争性方法直按测量溶液中小分子的含量。

  在反应体系内加入未标记抗原(待测抗原)和一定量用荧光素标记的小分子抗原,使二者与特异性大分子抗体竞争结合。当待测抗原浓度高时,大部分抗体被其结合,荧光素标记的抗原多呈游离的小分子状态,小分子在液相中转动速度较快,测最到的荧光偏报程度也较低。反之,大部分荧光素标记抗原与抗体结合,形成大分了的抗原抗体复合物,检测到的荧光偏振程度也较高。荧光偏振程度与待测抗除浓度呈反比关系,利用这一原理,可以精确地得知样品中待测抗原的相应含量。FPIA还可以对抗体进行检测。

  荧光偏振与荧光免疫偏振技术的应用由相关原理可以看出,荧光偏振和FPIA技术很适合研究分子间相互作用,可用于评价、温度、盐浓度等对分子结合的影响,同时这项技术低毒、灵收、快述,样品可重复利用等优势,被广泛向用于环境监测、食品安全监督、疾病诊扩和化学、生命科学的相关分析中。

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