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平板在培养箱中培养时易发生开裂,其原因和应对措施有哪些?

浏览: 6 次 发布时间:2023-06-25

开裂原因:

1、琼脂

琼脂本身的质量:不同的琼脂在保水性和弹性方面有差异,弹性好的琼脂在失水后变薄或缩小,弹性差的琼脂出现开裂。

琼脂使用量:琼脂过量琼脂粉浓度高,导致平板较硬,例如一些低营养培养基,其碳源、氮源基本为无机盐,培养基成分中大部分为琼脂,这类培养基培养时间过长的话,易造成水分流失而干裂培养基灭之后最好不要放置时间过长或者二次溶解会减少水份

平板生产过程:培养基倒平板时的温度一般49-50℃,一瓶培养基400mL,倒至底部培养基已经开始凝固,因此需要快速倾倒,倒至底部时轻轻摇匀培养基冷却凝固时,开风吹的时间过长一般冷却凝固时间为15-20分钟

2、平板

平皿本身的质量:平皿不平盖不严空隙过大使的透气量过大能使水分大量挥发但平皿的密封性过高有可能影响需氧微生物的生长,因此需要根据实际情况选择透气性合适的平皿

倾注的培养基少,平板较薄,易开裂。

 

3、培养箱

生化培养箱非隔水式的培养箱立式培养箱不停加热,用风使内部的温度均匀气流循环带走水分导致培养干燥风速太大容易将平板吹干、吹裂另外,生化培养箱在制冷时会蒸发水分,为保证温度波动小,会频繁加热制冷,可以试着调节培养箱压缩机的启动温度

 

4、效期

新制备的平板一般不容易出现干裂问题,而长时间保存的储存温度的平板更容易出现干裂现象。

 

针对上述原因,分别对应措施:

 

1、琼脂

比较不同厂家的琼脂质量,选择最优厂家。

培养基配置多加点水适量降低琼脂粉浓度,配置过程避免溶解时间太长,水分挥发过多。

寻找合适生产线,不用人工倒平板,恒温匀速流出,干燥过程避免风吹。

 

2、平板

检查平皿的质量,选择透气性合适的平皿

板倒得稍厚一点按照GB4789要求,倾注融化的培养基到平皿中,使之在平皿中形成厚度至少为3 mm(直径90 mm的平皿,通常要加入18 mL~20 mL琼脂培养基)。如果平板需储存,或者培养时间超过48 h或培养温度高于40℃,则需要倾注更多的培养基。

3、培养箱

培养箱出厂设置的风速一般是100%的,有些如进口培养箱是可以调风速的,一般调60-70%就可以

培养基摆放远离风扇不要放到培养箱的最底部,一定要放在架子上,因为底部的温度会比较高,蒸发水份快。

ISO提到用塑料袋或者保鲜袋包着培养基,但是要留着开口通风换气开口方向背对出风口;也可以在加样后,贴上封口膜,再放入培养箱试试,也许会影响到耗氧,是否影响菌生长,可以做个对照实验试试看拿报纸把平皿挡起来

培养箱无菌使用开口大点容器如托盘、平皿等及时添水,避免干涸,保持室内湿度

用细菌培养箱和霉菌培养箱或没有鼓风系统的小型培养箱烘箱自带干燥功能,培养基肯定会干资金足够尽量买恒温恒湿培养箱

 

4、效期

如接单生产,避免长时间储存。冷库存放。


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