（ 布鲁氏菌 Tb 噬菌体  10*0.5 mL /盒  /  布鲁氏菌 Bk2 噬菌体  10*0.5mL /盒 ）

1.实验原理：

不同噬菌体与待检布鲁氏菌混合，在培养皿上发生对应特异的布鲁氏菌裂解斑，根据其特点，分析所裂解菌株的布鲁氏菌所属种别。

2.可选试剂：

ZC-BRUCELLA-012     布鲁氏菌 Tb 噬菌体（规格: 10*0.5 mL /盒）；

ZC-BRUCELLA-013    布鲁氏菌 Bk2 噬菌体（规格: 10*0.5mL /盒）；

布鲁氏菌噬菌体裂解试剂盒：内含布氏琼脂平板（90mm*10个），Bk2 噬菌体（0.5mL*1 瓶），半固体琼脂（10支），Tb 噬菌体（0.5mL*1 瓶），私人定制。

3.实验方法：

①实验前准备：在实验的平皿培养基进行标注、编号；取待检布鲁氏菌 48 h 培养物，用生理盐水中研磨制成约 10⁹/mL 菌悬液；实验前将噬菌体试剂从冰箱中取出。

②用法：将增殖菌比浊成 10 亿菌体 /mL 或 OD 值为 1.5 的菌液浓度，取 0.1 mL 加到溶化并在 56 ℃ 水浴保温的半固体琼脂中，缓缓混匀，然后倾注到底层为布氏琼脂平板上，铺均匀。菌液半固体凝固后，用加样器分别吸取噬菌体 8 μL ，分别滴加在菌液半固体琼脂表面的标注位置上，待干后，置 37 ℃ 温箱中培养， 24 h～48 h 观察结果。

③结果判定：如果在培养皿滴加噬菌体处出现透明噬菌斑即为裂解，否则为不裂解。

Bk2 噬菌体：裂解所有光滑型布鲁氏菌；

Tb 噬菌体：裂解光滑型牛种和猪种布鲁氏菌；

Tb 噬菌体（1000 倍稀释液）：只裂解光滑型牛种布鲁氏菌。

4.试验现象图片：（暂无）