(    百日咳鲍特菌增菌培养检测试剂盒（带拭子）        20T/盒    )

1、操作方法

①样本采集

根据采样要求，使用鼻/咽拭子采集样本；将采样拭子放到百日咳鲍特菌样本采集液中，折断采样拭子杆高出部分或按断点折断拭子，拧紧盖子，标记样本信息，冷藏送至实验室处理。

若标本预计 48h 内进行检测，可于 2~8℃ 冷藏保存；若标本计划 1 个月内完成检测，可于 -20℃ 低温冻存；若标本需长期保存，可 -70℃ 以下超低温冻存。低温保存期间标本不可冻融。

(  百日咳鲍特菌样本采集液   2mL*50支 /盒  )

②样本处理：

将样本采集液中的鼻/咽拭子充分挤压 50~80 次或者涡旋震荡 30s ，让标本中的细菌均匀分布于采集液。冻存标本需解冻溶化后按上述方法混匀使用。处理后的标本可进行 PCR 鉴定，也可以接种于选择培养基或增菌培养基进行分离培养。

③样本增菌：

1）增菌液配制：百日咳鲍特菌增菌液须现用现配，实验前取所需数量的基础增菌液、添加剂 A、添加剂 B，无菌操作放入生物安全柜，溶化后将添加剂 A、B 颠倒混匀瞬时离心，分别取添加剂 A 20μL、添加剂 B 200μL 加入到 1.8 mL 的基础增菌液中混匀备用。

注：①实验过程严格执行无菌操作；②百日咳鲍特菌增菌液需要现用现配；③添加剂反复冻融会降低分离培养效果，建议第一次使用后适当分装冻存。

2）增菌培养：取 200μL 混匀后的采集液，加入到 2 mL 现配的百日咳鲍特菌增菌液中，36±1˚C 静置培养 48 h～72 h。

④平板培养：

平板培养：增菌后充分混匀培养液，取 50-100μL 的增菌液划线或者直接涂抹于木炭选择性琼脂平板上，37±1˚C 培养 3～7 天，挑取疑似菌落进行镜检、生化试验、荧光 PCR 或者质谱等方法鉴定。

2、百日咳鲍特菌菌落图片：

(  银灰色菌落： 疑似百日咳鲍特菌、副百日咳鲍特菌  )