(     支原体液体培养基           4mL*20 支 / 盒     )

1、操作方法：

一、肺炎支原体分离培养：

1. 使用支原体样本采集液采集样本，将采集的样本进行振荡混匀；取 200-400 μL 混匀后的样本采集液加入到支原体液体培养基中，颠倒混匀后，放入 37 ℃ 培养箱中培养，同时培养 1 支不加样本的支原体液体培养基作为阴性对照；

2. 每天观察培养基颜色变化，培养基变橙黄，且澄清无沉淀，表明支原体分离培养阳性；颜色无变化，可继续培养观察，14 天后仍无颜色变化，且澄清无沉淀，表明支原体分离培养阴性，应根据临床症状及其他检测方法综合判定；培养基变橙黄，但浑浊或有沉淀，样本可能被污染，可将采集液保存的样本过滤后重新培养或重新采样；

(     支原体样本采集液           2mL*20 支 / 盒  )

二、肺炎支原体增菌培养：

1. 将肺炎支原体分离培养变为橙黄色，且澄清无沉淀的培养基立即震荡混匀，取 200-400  μL 加入到支原体液体增菌培养基中，颠倒混匀后，放入 37 ℃ 培养箱中培养，同时培养 1 支不加样本的支原体液体增菌培养基作为阴性对照；

2. 每天观察培养基颜色变化，培养基变橙黄色，且澄清无沉淀，立即进行涂板和保菌；

(  支原体液体增菌培养基    10mL*20 支 /  盒  )

三、肺炎支原体涂板：

将肺炎支原体增菌培养变为橙黄色，且澄清无沉淀的培养基振荡混匀，选择 2~3 个适宜稀释度的菌液各 10  μL 加入支原体琼脂平板中，用接种环涂布均匀，倒置，放入 37 ℃ 培养箱需氧培养 5~7 天；将支原体琼脂平板放到电子显微镜下进行观察，菌落呈典型“油煎蛋”状，大小不一，大的直径超过 1mm ；

(  支原体琼脂平板    70mm*10 块 /  包  )

四、肺炎支原体保菌：

将肺炎支原体增菌培养变为橙黄色，且澄清无沉淀的培养基放入离心机，12000 离心力，4 ℃ ，离心 20 min，弃上清，向管中加入 2mL 支原体菌种保存液重悬，重悬菌液按 500  μL 每管分装于 4 支空冻存管中，做好标记，-70 ℃ 及以下冷冻保存。

(  支原体菌种保存液   2mL*20 支   /  盒  )

2、试验现象图片：（无）

（  图 1   使用支原体液体培养基对样本进行培养，培养前/后对照图片  ）

(  图 2   使用支原体液体增菌培养基对分离培养变为橙黄色的样本进行培养，培养前/后对照图片  )