( 兔抗百日咳鲍特菌诊断血清 1mL / 瓶 / 兔抗副百日咳鲍特菌诊断血清 1mL / 瓶 )
1、检测前准备:
0.85% 生理盐水、蜡笔或防水笔、载玻片、一次性接种环、背景为黑色的光源、计时器
2、检测流程(以百日咳诊断血清为例):
① 产品在使用前,由冰箱拿出,平衡到室温后使用,所有操作严格遵守生物安全操作规范,在 BSL-2 级生物安全柜内进行操作。
② 用酒精擦拭载玻片。用蜡笔或防水笔在载玻片上分两个区,每个区分别滴入一滴(约 40uL)生理盐水。
③ 一次性接种环挑取适量经纯培养的疑似菌,在每滴生理盐水中充分乳化,以便获得乳白色均匀、致密菌悬液。
④ 向一区中加入一滴(约 40uL)生理盐水,混合均匀,作为阴性对照,向另一区加入 1 滴(约 40uL)百日咳鲍特菌诊断血清,混合均匀。
⑤ 振荡或手动晃动 2-3min,期间观察是否有凝集现象,使用黑暗背景下光源透射,更容易观察到凝集现象,最长观察时间不应超过 5min。
⑥ 凝集实验后应按照生物安全规范要求,对所有样本、微生物培养物和接种产品都应该视为具有感染性,实验后进行相应无害化处理。
3、检验结果的解释:
当抗血清与细菌接触,会引起凝集反应,使细胞(细菌)凝集或呈簇,细胞(细菌)上清液变得清亮,细胞悬液浓度或使用的抗血清浓度不同,会产生不同的强度的凝集反应,见图示,呈现“+”及“+”以上的凝集,均可视为阳性结果,否则记为阴性。
++++ 所有的细胞都发生凝集,细胞悬液清亮。
+++ 75%的细胞发生凝集,细胞上清略微浑浊不清。
++ 50%的细胞发生凝集,细胞上清略微浑浊不清。
+ 25%的细胞发生凝集,细胞上清略微浑浊不清。
± 少于 25%的细胞发生凝集,可见有颗粒状的成分。
- 没有肉眼可见的凝集,悬液仍呈现乳白色均匀、致密。