(六)噬菌体裂解试验
表1 布鲁氏菌噬菌体分群
群别 | 株名 |
1 | Tb A422 22/XIV |
2 | Fi75/13 Fi75/6 Fi75/8 Fi75/9 Fi75/10 Fi75/12 |
3 | Wb M51 S708 MC75 D |
4 | BK0 BK1 BK2 |
5 | R R/O R/C R/M |
6 | Iz |
倾注法:将增殖菌比浊成10亿菌体/ml,取0.1ml加到溶化并在50~56℃水浴保温的布氏半固体培养基中,然后倾注到底层为布氏琼脂培养基上。凝固后,将各种稀释度的噬菌体滴至不同位置上,干后放37℃温箱中培养 24~48 小时,观察结果。能完全裂解增殖菌的噬菌体最高稀释度定为RTD。此法噬斑清晰、透明、易于判定结果。
布鲁氏菌噬菌体的宿主范围:
第1群: 在 RTD 下只裂解光滑型牛种布鲁氏菌,不裂解其他种布鲁氏菌;当浓度增大到 104×RTD 时,也可裂解光滑型猪种和沙林鼠种布鲁氏菌。
第2群: 在RTD 浓度下裂解光滑型牛种和沙林鼠种布鲁氏菌,不裂解其他种布鲁氏菌;当浓度增大到104×RTD时,也可裂解光滑型猪种布鲁氏菌。
第3群: 在 RTD 浓度下裂解光滑型牛种、猪种和沙林鼠种布鲁氏菌,当浓度增大时,其裂解作用没有扩大。
第4群: 在 RTD 浓度下裂解光滑型牛种、猪种、羊种和沙林鼠种布鲁氏菌当浓度增大时,其裂解作用没有扩大。
第5群: R 噬菌体在 RTD 浓度下只裂解粗糙型牛种菌,不裂解其他种布鲁氏菌。当浓度增加时,可裂解光滑型和粗糙型牛种布鲁氏菌,不裂解其他种布鲁氏菌。
R/O 噬菌体在 RTD 浓度下可裂解光滑型牛种和绵羊附睾种布鲁氏菌,当浓度增加时,也可裂解光滑型沙林鼠种布鲁氏菌。
R/C 噬菌体在 RTD 浓度下可裂解粗糙型牛种和犬种布鲁氏菌。当浓度增加时,也可裂解绵羊附睾种布鲁氏菌。
第6群: 在RTD浓度下可裂解粗糙型羊种菌和猪种菌。