1、 预增菌 

无菌操作取25g(mL)样品,置于盛有225mLBPW 的无菌均质杯中,以8000r/min～10000r/min 均质1min～2min,或置于盛有225mLBPW 的无菌均质袋内,用拍击式均质器拍打1min～2min。 

对于液态样品,也可置于盛有225mLBPW 的无菌锥形瓶或其他合适容器中振荡混匀。如需调节 pH 时,用1mol/LNaOH 或 HCl调pH 至6.8±0.2。

无菌操作将样品转至500mL锥形瓶或其他合适容器内(如均质杯本身具有无孔盖或使用均质袋时,可不转移样品),置于36 ℃±1 ℃培养8h～18h。

对于乳粉,无菌操作称取25g样品,缓缓倾倒在广口瓶或均质袋内225mLBPW 的液体表面,勿调节pH,也暂不混匀,室温静置60min±5min后再混匀,置于36 ℃±1 ℃培养16h～18h。 

冷冻样品如需解冻,取样前在40 ℃～45℃的水浴中解冻不超过15min,或在2℃～8℃冰箱缓慢化冻不超过18h。 

2、 选择性增菌 

轻轻摇动预增菌的培养物,移取0.1mL转种于10mLRVS 中,混匀后于42 ℃±1 ℃培养18h～24h。

同时,另取1mL转种于10mLTTB 中后混匀,低背景菌的样品(如深加工的预包装食品等)置于36 ℃±1 ℃培养18h～24h,高背景菌的样品(如生鲜禽肉等)置于42 ℃±1 ℃培养18h～24h。 如有需要,可将预增菌的培养物在2 ℃～8 ℃冰箱保存不超过72h,再进行选择性增菌。 

3、 分离 

振荡混匀选择性增菌的培养物后,用直径3mm 的接种环取每种选择性增菌的培养物各一环,分别划线接种于一个 BS琼脂平板和一个 XLD 琼脂平板(也可使用 HE 琼脂平板、沙门氏菌显色培养基平板或其他合适的分离琼脂平板),于36℃±1℃分别培养40h～48h(BS琼脂平板)或18h～24h(XLD 琼脂平板、HE琼脂平板、沙门氏菌显色培养基平板),观察各个平板上生长的菌落的菌落特征。

如有需要,可将选择性增菌的培养物在2 ℃～8 ℃冰箱保存不超过72h,再进行分离。