1、TOP 7 STEC 分离培养的难点?
产志贺毒素大肠埃希氏菌(STEC),又名肠道出血性大肠埃希氏菌,其分泌的志贺毒素Stx1和Stx2,能够引起宿主肠粘膜上皮细胞形成黏附及擦拭性损伤,造成出血性结肠炎或血性腹泻,严重者可发展为溶血性尿毒综合征。人们往往因为食用了携带该菌的肉制品、引用了被牛、羊粪便污染的水源或绿叶蔬菜而被感染。
依据STEC的菌体抗原及鞭毛抗原可将其分为400多种血清型,其中大肠埃希氏菌O26、O45、O103、O111、O121、O145、O157为主要致病的7种血清型(TOP 7 STEC),食品中低于100 CFU 的 TOP 7 STEC 就可能导致人类患病。
采用选择性增菌液对大肠埃希氏菌进行分离培养的过程中,由于Top 7 STEC 除了能产志贺毒素外,与普通大肠埃希氏菌在生化特性上没有差异,因此,普通大肠埃希氏菌与Top 7 STEC形成竞争生长而常常将其掩盖,严重影响分离效果。
2、TOP 7 STEC 免疫磁珠来解决!
如何对TOP 7 STEC进行精准的筛选?免疫磁珠法很好的解决了这个问题!
该方法的免疫磁珠,包被7种特异性抗体,可识别血清型为O26、O45、O103、O111、O121、O145、O157的STEC,对增菌液中的TOP 7 STEC进行“靶向抓取”,而不识别和结合非目标血清型和其他常见微生物。筛选后再进行相关基因的检测,这极大地消除了增菌液中普通大肠埃希氏菌对TOP 7 STEC的干扰。
3、自动化操作,无需人工——免疫磁珠分离纯化系统
配合免疫磁珠分离纯化系统使用,自动化操作,无需人工,还具有以下优势:
①更高效:半小时内完成16个样品的分离纯化,高效省力;
②更灵活:可单独上样,或与阴、阳性质控一起处理,灵活简便;
③更稳定:与手工操作相比,稳定性好,回收率高,重复性好;
④适应多种菌检测:支持其他菌种如沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、单核增生李斯特菌的免疫磁珠法分离纯化。
4、与荧光PCR方法联用完成快速检测
通过免疫磁珠法富集TOP 7 STEC后,可通过与五种致泻大肠埃希氏菌(14基因)核酸检测试剂盒联用,完成血清型的鉴定;可使用该试剂盒检测五种致泻大肠埃希氏菌,也可只使用预混液1检测STEC。







