革兰氏染色是食品微生物检测过程中需要经常用到的染色方法,也是微生物检验员的基本功之一。通过革兰氏染色,可以了解目标细菌的革兰氏性状及菌体形状。
革兰氏染色法的原理:通过结晶紫初染和碘液媒染后,在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物,革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密,故遇乙醇脱色处理时,因失水反而使网孔缩小,再加上它不含类脂,故乙醇处理不会出现缝隙。因此能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内,使其仍呈紫色;而革兰氏阴性菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度差。在遇脱色剂后,以类脂为主的外膜迅速溶解,薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出,因此通过乙醇脱色后仍无色,再经沙黄等红色染料复染,就是革兰氏阴性菌呈红色。
大肠埃希氏菌(革兰氏阴性菌)的镜检图片
金黄色葡萄球菌(革兰氏阳性菌)的镜检图片