荧光偏振仪

  荧光偏振(fluorescence polarization, FP)通常定义为:用垂直方向的偏振光激发荧光分子,然后测发射偏振光在垂直方向和水平方向的荧光强度。

  1926年荧光偏振现象首次被提出。如果被激发的荧光物质处于静止状态,该物质仍将保持原有激发光的偏振性；如果被激发的荧光物质处于运动状态,该物质发出的偏振光将区别于原有被发光的偏振特性,也就是所谓的荧光去偏振现象。

  20世纪50年代荧光偏振理论并首次将熒光偏振用于生代分析领域。

  早期的荧光偏振研究均以P表示,目前其仍常用于临床化学和药物筛选;而A多生物学检测,是因其便于进行数据分析和解释某些相关的物理学参数。

  20世纪80年代,随着荧光探针和荧光偏振分析仪器商业化,荧光偏振技术在生命科学等各个领域扮演越来越市要的角色。

荧光偏振免疫技术

   荧光免疫分析法包括：荧光抗体技术和荧光免疫测定分析技术。荧光抗体技术主要用于检测组织或细胞中抗原；荧光免疫测定分析技术分为：时间分辨荧光免疫测定和荧光偏振免疫测定(FPIA)，用于检测体液中微量物质。

   荧光标记的小分子抗原在溶液中旋转速度快,荧光偏振光强度小。当荧光标记的小分子抗原与其相成抗体结合后,所形成的大分子在溶液中旋转速度变慢,荧光偏振光强度增大。FPIA方法依据荧光标记抗原和其抗原抗体结合物之间荧光偏振程度的差异。用竞争性方法直接测量溶液中小分子的含量。例如,将荧光素标记的小分子药物、含待测末标记的小分了药物的人体液及该小分子药物的抗体混和,若体液中待测未标起的小分子药物浓度低,则标记的药物分子与抗体结合的就多,由于抗体分子大,所形成的荧光素标记的药物分子与抗体的结合物体积亦大,旋转减慢,荧光偏振光做度就高。反之,荧光偏振光强度就低,利用这一原理,用标记药 物的浓度与对应的荧光偏振值做工作曲线,便可进行定量分析。另外.FPIA方法不仅能减测抗原,也能对抗体进打检测。

   荧光偏振免疫分析技术操作简单、易于自动化、适于快速筛选可根据不同抗原的特异性进行荧光标记,结合特异性抗体,根据荧光偏振值的变化进行定量分析。目前,荧光偏振免疫分析技术在病原检测方面已经得到了广泛应用,国内已有针对各种病原建立的荧光偏振免疫技术的报道。

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