荧光偏振技术的临床应用及优势

荧光偏振免疫技术(Fluorescence Polarizatior Immunassay)-这是一项相对较为成熟的技术。它利用荧光偏振原理，采用竞争结合法机制,常用来监测小分子物质如药物、激素在样本中的含量。

以药物检测为例,以荧光素标记的药物和含待测药物的样本为抗原,与一定量的抗体进行竞争性结合。荧光标记的药物在环境中旋转时,偏振荧光的强度与其受激发时分子转动的速度成反比。大分子物质旋转慢,发出的偏振荧光强;小分子物质旋转快,其偏振荧光弱(去偏振现象）。因此,在竟争性结合过程中,样本中待测药物越多,与抗体结合的标志抗原就越少,抗原抗体复合物体积越大,旋转速率越慢,从而激发的荧光偏振光度也就越少。当我们知道了已知浓度的标记抗原与荧光偏振光性的关系后就可以測量未知浓度的物质。因此,这项技术可用来检测环境或食品样品中有毒物质如农药的残留量。

此外,临床医学诊断也在广泛采用荧光偏振。除应用上述方法可测定人体体液样本中某一特定物质的含量外,也可直接应用于临床诊断。例如,由Cercek等开发的恶性胖瘤诊断方法中提出,进入淋巴细胞的荧光物质,受胞浆浓度有序性的干扰,其运动方向和速率会发生变化。胞浆粘度高时,荧光物质运动变慢,受偏振光激发产生的激发光与胞浆粘度低时产生的激发光性质不同。通过追踪测定激发的编振光性质,即可了解淋巴纽胞的胞浆流动性、粘度等环境的变化,结合其它辅助诊断方法,可有助于癌症的早斯诊断。利用荧光偏振,还可检测病人样本中病毒DNA 如HBv、HPv的复制量,为临床诊断提供有力的量化指标依据。

荧光偏振技术的优势荧光偏振技术比研究蛋白质与核酸结合的传统方法具有更多优势(特别是不生成有害的放射性废物)并且检测限更低,可达亚纳摩尔级范围。此外荧光偏振是真正均相的,允许实时检测(动力学检测),对于浓度变化不敏感,是均相检测形式(中间不含洗涤步骤)的最佳解决方案。

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