（一）使用中创汇科双相培养瓶培养布鲁氏菌

（1）培养瓶接种与培养 按照相应培养瓶的要求采集 5ml~10ml 的全血注入培养瓶中，放入培养箱中 37℃培养。隔日观察培养瓶的生长情况，同时轻缓摇动培养瓶数次，使液相充分均匀铺满固相表面，一般培养不少于4周。亦可使用中创汇科全自动血培养仪配合布病专用培养瓶进行全血培养。

（2）分离培养 如发现固相表面有菌生长，取出培养瓶，在生物安全柜中打开 培养瓶盖。用接种环挑取单个菌落接种于血平板或布氏琼脂斜面上， 37℃培养 24~48 小时，取培养物进行布鲁氏菌鉴定；如接种 4 周后 未见明显菌落生长，在生物安全柜中打开培养瓶盖，抽取培养液 0.5ml 接种于血平板或布氏琼脂或布病选择培养基上，37℃培养24-48 小时，若无菌落生长则确认为培养阴性，若有菌落生长则进行鲁氏菌鉴定。

（二）血培养物核酸检测 

1.样本处理 在生物安全柜内取培养后的血培养物 1ml，加入到 1.5mlEP 管 中，100℃加热 10min，12000rpm 离心 5min，上清即为灭活后的粗 提模板。将粗提模板拿出 P2+实验室，再采用全自动核酸提取仪或 手工 DNA 核酸提取试剂盒进行精提。

 2.核酸精提 如使用全自动核酸提取工作站，可把粗提核酸当作样本按照说 明书操作。 如使用手工法提取，参照试剂盒操作（如：QIAamp DNA Blood Mini kit）。

 3.实时荧光 PCR 检测：使用中创汇科生产的血液等组织中微量布鲁氏菌核酸检测试剂盒进行鉴定。

青岛中创汇科生物科技有限公司现已转产投产多种特色产品，其中弯曲菌分离培养检测试剂、布鲁氏菌检测试剂、全自动血培养仪、兔补体、荧光偏振仪（布鲁氏菌强化监测项目）等产品自上市以来，获得了客户一致好评。

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