菌片用载体应根据消毒对象选择相应的材料,如手术器械选择不锈钢片,物体表面选择棉布片,非金属管腔选择聚四氟乙烯片(管),光滑表面可选择玻璃片等。常用的材料有金属、玻璃、滤纸、棉布、聚四氟乙烯等,金属载体一般用12 mm 直径圆形金属片(厚 0.5 mm),其他材质载体一般为方形,大小 10 mmx10 mm,特定用途的消毒产品可使用其他材质、形状的载体。所用载体(除滤纸片外)于染菌前,应进行脱脂处理。脱脂过程应严格按照如下步骤进行:
a)将载体放在含洗涤剂的水中煮沸30min;
b)以自来水洗净;
c)用蒸馏水煮沸 10 min;
d) 用蒸馏水漂洗至 pH 呈中性;
e)晾干、熨平备用;
布片用40织纱的白平纹棉布制作。将脱脂后的布块按载体规定的大小抽去边缘一周的经纬纱各一根,按抽纱痕剪开。金属片以不锈钢制作,纸片以滤纸制作。
载体经压力蒸汽灭菌后,使用滴染法染菌。
染菌用菌悬液:菌悬液和芽胞悬液的制备按 5.1.2 进行,试验用菌悬液的含菌量约为109CFU/mL,可使用浊度计调整菌液浓度。然后加入等量 3.0%或 0.3%的牛血清白蛋白,使菌液的浓度约为 5x108CFU/mL。
滴染法染菌时,将经灭菌的载体片平铺于无菌平皿内,用移液器逐片滴加菌液,必要时用接种环涂匀整个载体表面。置 36℃士1℃恒温培养箱或室温干燥备用。
每个菌片(载体)的回收菌量应为 1x106CFU/片~5x106CFU/片。